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上海酶联生物如何正确选择ELISA试剂盒
更【gèng】新时间【jiān】:2024-9-20   点击次数:907次【cì】


ELISA试剂盒以灵敏【mǐn】度较高、特异性【xìng】较好【hǎo】的特点在实【shí】验中【zhōng】得到了广泛【fàn】应用,然【rán】而新手们面对各种各样、动则上千种的ELISA试【shì】剂【jì】盒,内心应该是崩溃的【de】。各种厂【chǎng】家、品牌,各种【zhǒng】种属,各种参数,琳琅满目【mù】,质量良莠不齐,如何浪里淘金,选择既符合研【yán】究需求,又品【pǐn】质上【shàng】乘的 ELISA 试剂盒呢【ne】?今天教教【jiāo】大家如何正确找到【dào】合适的【de】ELISA试剂盒。

1.要明确样本类型

不同【tóng】厂【chǎng】家验【yàn】证【zhèng】样本类【lèi】型不同【tóng】,即使【shǐ】同一厂家不同试剂盒,其验证样本类型也不尽【jìn】相同。特【tè】别是复杂的血【xuè】浆样本,根据样【yàng】本处理方式的差异,分为 EDTA 血浆、肝素【sù】抗凝血【xuè】浆和【hé】柠檬酸盐【yán】血浆,因此购买前需仔细核【hé】对。

2.要会预测自己的目标因子的浓度

一般来【lái】说,待测因子可以【yǐ】根据经验【yàn】或资料【liào】获得参考的检测【cè】范围【wéi】,且正常人【rén】与疾病状【zhuàng】态存在差异。如热门炎【yán】症因子 IL-6,正常人血清【qīng】中浓度为 3.13 pg/mL,病【bìng】人会显著【zhe】增高,CAR-T 回输病【bìng】人血清中的 IL-6 浓度甚【shèn】至为正常人的 200 倍以上【shàng】。因而【ér】,必【bì】要时【shí】进行样本的稀释及选择合【hé】适检测范围的试剂盒极其重要。若【ruò】浓【nóng】度太低,可选【xuǎn】择高敏【mǐn】试【shì】剂盒;若不确定待测浓【nóng】度或样本间浓【nóng】度差异较大,建议使用检测动态范【fàn】围更【gèng】宽的化【huà】学【xué】发光法ELISA试剂盒。如同样为 IL-6 ELISA 试剂盒,各类型检测范围差【chà】异【yì】较大,需要根据实际【jì】情况选择合适的试【shì】剂盒。

3.检查试剂盒进行过哪些质控

质【zhì】控数据在说明书中即可找到,在购买前检查【chá】试剂盒是否进行过严格的质控实验,包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验【yàn】、线性稀【xī】释实【shí】验【yàn】及【jí】交叉反【fǎn】应测【cè】试【shì】等,每个【gè】数【shù】据【jù】好都看一下,确保结果重现性及准确性。

4.确定需检测的因子数量

如【rú】果待测因子超【chāo】过 5 个,且样【yàng】本量较小时,单因【yīn】子【zǐ】 ELISA 检测方法并【bìng】不是。建议考虑多因子检测【cè】方法【fǎ】,如【rú】固相芯片(样本数量一般 5 个以内,检【jiǎn】测【cè】指【zhǐ】标可达上百【bǎi】个)及 Luminex 液相芯片方法(检测样本多达 80 个【gè】,检测指【zhǐ】标多达 50 个【gè】)或微流控 ELISA 检测系统 Ella。可节约样本及时间成本,也【yě】可保证检测结果准【zhǔn】确。

5.预算评估

预算【suàn】往往是大家【jiā】优先考虑的,实【shí】际【jì】上,不能够一味讲究产品价格【gé】,更【gèng】需要【yào】考虑性价比。生物学是极【jí】其【qí】严谨的科学,一【yī】致性的实验【yàn】结果是【shì】基金、文章等【děng】评审过程中【zhōng】的因素,即使低廉【lián】的价格,不能够重现结果,也是资源的另一种浪费。


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