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血清封闭剂的范围及方法
更新时【shí】间:2024-9-24   点【diǎn】击次数:2232次

血清封闭就是将养殖的非免疫的正常动物【wù】采血【xuè】,然后不加【jiā】抗凝剂,血液凝固,血快收【shōu】缩,析【xī】出的【de】淡液体。经过特【tè】殊工艺处理后【hòu】的血清,特别适在各类免疫学实验【yàn】中用于封闭处【chù】理,

 

封闭步骤可减少一【yī】抗和二抗与非靶标【biāo】位点进【jìn】行非特异性结合时所产生的【de】本底信号。理想情况是,封闭剂将占【zhàn】据样本中的“黏【nián】性【xìng】”位点,比【bǐ】如暴【bào】露的带【dài】电性或疏【shū】水性蛋白表面,同【tóng】时【shí】不会干扰一【yī】抗/二抗识【shí】别靶表【biǎo】位,从而尽可能【néng】提高信噪比(S/N)。

 

封闭血清适用【yòng】于免疫组【zǔ】化或者免疫荧光实验中【zhōng】样【yàng】本的封闭【bì】。可以【yǐ】封闭待检【jiǎn】样本【běn】中与蛋白质非特异性【xìng】结合【hé】的位点,另外还可以【yǐ】封闭样品中内【nèi】源【yuán】性的Fc片段结合位点【diǎn】,阻【zǔ】断抗体与样品中的Fc受体结合,从【cóng】而降低背景,减少假阳性。对于适用多【duō】抗的实验,二抗种【zhǒng】属【shǔ】来源【yuán】的正常血【xuè】清是封闭处理的【de】金标准。

 

生物试剂的使用常识:

(1)试剂切忌与手接触(有些试剂有强腐蚀性、等特性)。

(2)要用洁净的药勺,量筒或【huò】滴【dī】管【guǎn】取【qǔ】用试【shì】剂【jì】,不允许用同一种工具同时连续【xù】取用多种试剂。取【qǔ】完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,才【cái】可【kě】取【qǔ】用【yòng】另一种试剂。

(3)试剂取【qǔ】用后一定要将瓶塞盖紧,不可放【fàng】错瓶盖和【hé】滴管,绝不允许张【zhāng】冠李戴【dài】,用完后请及时将【jiāng】瓶放回原处【chù】,以免【miǎn】遗忘,带来【lái】不便。

(4)已取出的试剂不【bú】能再【zài】放【fàng】回原试剂瓶内(怕产生原试【shì】剂的再次污染)。       

 

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