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ELISA试剂盒实验样本收集准备小结
更【gèng】新时【shí】间【jiān】:2024-9-24   点击次数:1108次

ELISA试剂盒样本实验准备:

在收集样本【běn】前都【dōu】必须有一【yī】个完整【zhěng】的计【jì】划,必须【xū】清楚要检测的成【chéng】份【fèn】是否【fǒu】足够【gòu】稳定。对收集后当【dāng】天【tiān】就进行检测的样本【běn】,及时储存在4℃备【bèi】用。对于隔天再检测的样本,及时分装后【hòu】冻存【cún】在-20℃备用,有条【tiáo】件的,-70℃冻存备用。标本应避【bì】免反复冻融【róng】。

 

液体【tǐ】类标本【běn】:  包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊【jǐ】液、细胞培养【yǎng】上清等。

 

1.  血清:室【shì】温【wēn】血液【yè】自然【rán】凝固9-24分钟后,离心【xīn】20分钟左右【yòu】(2000-3000转/分【fèn】)。仔【zǎi】细收集【jí】上清。保存过程中如有沉淀【diàn】形成,应再次离心。

 

2.  血浆:应根据标【biāo】本的【de】要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂【jì】,混合9-24分钟【zhōng】后,离心20分钟【zhōng】左【zuǒ】右(2000-3000转/分【fèn】)。仔【zǎi】细【xì】收集上清【qīng】。保存【cún】过程中如【rú】有【yǒu】沉淀形成,应再次离心。

 

3.  尿液【yè】:用【yòng】无菌管收集。离心20分钟左右【yòu】(2000-3000转【zhuǎn】/分)。仔细收集【jí】上【shàng】清。保存过程【chéng】中如【rú】有沉淀形【xíng】成,应再次【cì】离【lí】心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

 

4.  细胞培养上清:检测分泌性【xìng】的成份时,用无【wú】菌管收【shōu】集。离心【xīn】20分钟左右(2000-3000转【zhuǎn】/分)。仔细收【shōu】集上清。

 

5.  培养细【xì】胞【bāo】:检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.9-24.4)稀释【shì】细胞悬【xuán】液,细胞浓【nóng】度达到【dào】100万【wàn】/ml左右。通过反复【fù】冻融或加【jiā】入组【zǔ】织蛋白萃取【qǔ】试剂,以使细【xì】胞破坏并放出细胞内【nèi】成【chéng】份。离心20分钟左右(2000-3000转【zhuǎn】/分)。仔细收集上清【qīng】。保存过程中如有沉【chén】淀形成,应【yīng】再次离心。

 

6.  组织标本:切割标本后,称取重量【liàng】。加入一【yī】定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速【sù】冷冻保存备用【yòng】。标本融【róng】化后仍【réng】然保持9-24℃的温度。加入【rù】一定【dìng】量【liàng】的PBS(PH7.4),或【huò】组织蛋白萃取试剂, 用手【shǒu】工或匀浆【jiāng】器将【jiāng】标【biāo】本匀【yún】浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装【zhuāng】后一份待检【jiǎn】测【cè】,其余冷【lěng】冻备用【yòng】。

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