培养细胞的形态结构

组织培养细胞形【xíng】态结【jié】构与体内【nèi】细胞【bāo】基本相同，但在大体形态以及某【mǒu】些细微结构方面仍【réng】存在着一定【dìng】的【de】差异。

(一)形态分类

根据细胞是否贴【tiē】附于支持物【wù】上生长，形态【tài】有所不同。呈悬浮生长时，不【bú】论细【xì】胞原来【lái】源于体内何种类型细胞．由【yóu】于生长在【zài】液体环境中，胞体基【jī】本呈圆【yuán】形。大多数【shù】细胞【bāo】是贴附型【xíng】生长的。当细胞贴附【fù】在支【zhī】持物【wù】上后，细胞分【fèn】化现象常变得不显著【zhe】，易【yì】失去它【tā】们在体内时的原【yuán】有特征．在形态上表现单一化的现象。贴【tiē】附于支持物【wù】表面【miàn】后，开始仍为圆形，但为时很短【duǎn】，很快便【biàn】经过形态【tài】演变过渡成扁平形态【tài】。

1．成纤维细胞型：此细胞形态【tài】与体【tǐ】内成【chéng】纤维细胞的相似【sì】而得名，胞【bāo】体呈梭形或不【bú】规则三【sān】角形，中【zhōng】央有【yǒu】卵圆形核【hé】，胞质【zhì】向外【wài】伸出2～3个长短不齐的突起。细胞在生【shēng】长时呈放射状火焰状或【huò】旋涡状走【zǒu】行【háng】，除【chú】真正【zhèng】的成纤维细胞【bāo】外【wài】，凡由中胚层间充【chōng】质起源的组织，如心肌、平滑肌【jī】、成骨细胞、血管内皮等细胞常呈【chéng】此形【xíng】态。

2．上皮【pí】组织型：本型细胞呈扁平不规则【zé】多角形【xíng】，中【zhōng】有【yǒu】圆形核。细胞彼此紧密相连成【chéng】单层膜，生长时呈【chéng】膜状【zhuàng】移动；处于上皮膜【mó】边缘的细胞总【zǒng】与膜相连，很少脱离【lí】细【xì】胞群单独活动；起【qǐ】源于【yú】内【nèi】、外胚层细胞如皮肤表层【céng】、消化层上皮、肝、胰、肺【fèi】泡上皮等皆呈上皮型形态。

3．游走【zǒu】细胞【bāo】型：此【cǐ】型细胞【bāo】在支持物上散在生长，一般【bān】不连【lián】接【jiē】成【chéng】片，细胞质经常【cháng】伸【shēn】出伪【wěi】足或突起，呈活跃地游【yóu】走或变形运动。此型细胞不很稳定．有时亦难和其他型细胞相区别，在【zài】一定条件下，如培养基化学性质【zhì】变动等，它【tā】们也可能呈成【chéng】纤维细胞【bāo】形态。

4．多形【xíng】细【xì】胞型【xíng】：有【yǒu】一些【xiē】组织和【hé】细胞，如神经组织【zhī】的细胞等，难以确定【dìng】它们规律和稳定的形态，可通【tōng】归【guī】人多形细胞型。

(二)显措丝袖

在一般【bān】光学显微镜下直【zhí】接观察体外培养健康活细胞时，细【xì】胞是均质而透明的，结构极不明显【xiǎn】。只有【yǒu】用相差显微镜【jìng】才【cái】能看清细胞轮廓和内【nèi】部结【jié】构。培养中细胞【bāo】一般有1～2个核仁。用固定染色法和特殊技术【shù】可显【xiǎn】示【shì】出【chū】细胞器等结构【gòu】，但【dàn】在生活时的细胞中却不【bú】易【yì】观察到【dào】。在【zài】细【xì】如机能状态不良时，细【xì】胞轮廓【kuò】会增强，反【fǎn】差增大。在胞质中时而出【chū】现【xiàn】颗粒、脂滴和空泡等，是细胞【bāo】代谢【xiè】不【bú】良【liáng】的表现；反差很大【dà】的暗色小颗粒是【shì】变形的线粒【lì】体。细胞形态【tài】结构【gòu】与细胞在体外生【shēng】存时间的长短、细胞种类等有直接关【guān】系。初代【dài】培养的正常二倍体细【xì】胞，除【chú】大【dà】体形态外．在构造和生物学性状上与原体内细【xì】胞近似性大，细胞【bāo】均质性【xìng】和透明度都很强。随细胞在体外生活时【shí】间的延长和反复传【chuán】代。正常二【èr】倍体细【xì】胞会发生一定的【de】变化。其核型发生变化时．则产【chǎn】生多倍【bèi】体或异倍体细【xì】胞。形【xíng】态上轮廓增强、核仁【rén】增多、有【yǒu】时出现双【shuāng】核【hé】或【huò】多核巨细胞等。如细胞发【fā】生转化，它们的【de】形【xíng】态发生的变化更【gèng】大。

培养细胞形态学上的特【tè】征【zhēng】只可以在接种对【duì】象明确的情况下，大致【zhì】表【biǎo】明出细胞的类型【xíng】。如【rú】果要确【què】认培养物细【xì】胞的种类，必须【xū】借助特异性的鉴别【bié】方法加以识别。常用【yòng】细【xì】胞的某种特异性蛋白质【zhì】或肽的抗体进行免疫【yì】细胞化【huà】学【xué】染色鉴【jiàn】定。

(三)超微结构

透射电镜下，一【yī】般看不到【dào】培【péi】养细胞与体【tǐ】内的细胞形态结构方面【miàn】的明【míng】显差异。培养细胞膜亦分为三层结构，总厚【hòu】度【dù】约7．5nm，由双层类脂分子组成，双层分子间嵌【qiàn】有蛋白【bái】质【zhì】分子。细胞膜向外凸【tū】出形成泡状、叶状、丝状【zhuàng】和指状突起，长度比较一致，称微绒毛。随细胞类型【xíng】、正常或异常(肿瘤细【xì】胞【bāo】)，以【yǐ】及处于周【zhōu】期【qī】阶段【duàn】不同，微绒【róng】毛的形状和数量【liàng】均有差别。细胞间存在着一定的间【jiān】隙，成纤【xiān】维细【xì】胞之间的间隙不恒定，上【shàng】皮细胞相互之间一般有【yǒu】1.5～15nm的间隙。细胞相互接触部并可见到桥粒(desmcsome)。细胞膜表面【miàn】常附有由细【xì】胞分【fèn】泌形成的【de】糖蛋白膜【mó】，即细胞外衣。在细胞【bāo】膜下面有一【yī】层【céng】厚100～500n。m的胞质区，称为膜【mó】下皮质层，该层具有中【zhōng】等电【diàn】子密度【dù】，其中常见有直径5～7nm的【de】微丝。微丝在膜下皮质层中分布甚【shèn】广，它们【men】主【zhǔ】要由多聚肌纤蛋白组成【chéng】。线粒体【tǐ】、内【nèi】质网【wǎng】、高尔基氏复合体、中心【xīn】体和【hé】溶酶体等多集中在细胞质内，它们【men】的形态结【jié】构与【yǔ】体内细【xì】胞相似，但常随细【xì】胞生【shēng】长状态不同有很大变化。细胞【bāo】核超【chāo】微结构与【yǔ】体内细胞无【wú】大差别。永【yǒng】生性细【xì】胞【bāo】系和肿瘤【liú】细胞的【de】细胞核一【yī】般比较大，染【rǎn】色质比较丰富，核仁大而多【duō】。