在ELISA试剂【jì】盒中【zhōng】，进行各项实验条件【jiàn】的选择是很重【chóng】要的，其中包括；

    固相载【zǎi】体【tǐ】的【de】选【xuǎn】择：许多物质可作为固相载体，如聚【jù】氯乙烯、聚苯乙烯【xī】、聚丙酰胺【àn】和纤【xiān】维素等【děng】。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔【kǒng】聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使【shǐ】用前均【jun1】可【kě】进行筛【shāi】选：用等量抗原包被，在同一实验条件下【xià】进行反应，观察其【qí】显【xiǎn】色【sè】反应【yīng】是否【fǒu】均一性，据此判【pàn】明其【qí】吸附性能是【shì】否良好【hǎo】。
    包被【bèi】抗体（或抗【kàng】原）的选择：将【jiāng】抗体（或抗原）吸附在固【gù】相载体表【biǎo】面时，要【yào】求【qiú】纯度要好【hǎo】,吸附时一般要求【qiú】PH在【zài】9.0～9.6之间。吸附温度，时间【jiān】及其蛋白量也有一定影响【xiǎng】,一般【bān】多采用4℃ 18～24小【xiǎo】时。蛋白质包【bāo】被的zui适浓度需【xū】进行滴【dī】定【dìng】：即【jí】用【yòng】不【bú】同的蛋白质浓度（0.1、1.0和10μg/ml等）进行包被【bèi】后，在其它试验条件相同时，观【guān】察阳性【xìng】标【biāo】本的OD值。选择OD值大而蛋白【bái】量【liàng】少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为【wéi】1～10μg/ml。
    酶标记抗体工作浓度的选择：首先用【yòng】直接ELISA法进行【háng】初步【bù】效价的滴定（见酶标【biāo】记【jì】抗体部份）。然【rán】后再固定其它【tā】条件【jiàn】或采取“方【fāng】阵【zhèn】法"（包被物、待【dài】检样品的参考【kǎo】品及酶标记抗体分别为不同【tóng】的稀释【shì】度）在正式实验系统【tǒng】里准确地【dì】滴定其工【gōng】作浓度。
    酶【méi】的底【dǐ】物【wù】及供氢体的【de】选择：对供氢【qīng】体的选择【zé】要求是价廉、安全【quán】、有明显地显色反应，而【ér】本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌【ái】作【zuò】用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵【líng】敏度【dù】高的供氢体【tǐ】，如TMB和ABTS是目前较为【wéi】满意【yì】的供氢体。进口ELISA试剂盒底物作用一段时间后，应【yīng】加入强酸或【huò】强碱以终【zhōng】止反应。通【tōng】常底物作【zuò】用时间，以9-21分钟为宜。底【dǐ】物使【shǐ】用【yòng】液必须新【xīn】鲜配制【zhì】，尤【yóu】其是H2O2在临【lín】用前【qián】加【jiā】入。